4.3.1 取出一次性培养器先检查包装是否无损，在无菌室内打开无菌包装。 
4.3.2 将一次性培养器逐个插放在不锈钢排液槽上。 
4.3.3 将一次性培养器的弹性软管装入集菌仪的蠕动泵头，要求定位准确，软管走势顺畅。 
4.3.4 用中间的针孔插到样品瓶里，然后用尾端针孔插到稀释液里，开机，将稀释液倒置，把液体打入样品瓶中，样品瓶中液体加满后，放下稀释液，再倒置样品瓶，使样品通过培养器进行集菌。 
4.3.5 完成集菌后，开启已灭菌好的培养基瓶，将前端针头插入培养基中，稀释液瓶中针孔不要拔出。 
4.3.6 摘下一次性培养器顶部空气滤器开口的胶塞，套在一次性培养器的底口上， 
4.3.7 用夹子夹闭与一次性培养器连接部的软管，留出5-6cm软管，剪除其余部分，并将开口端插在空气滤器的开口上。 
4.3.8 分别按照规定时间培养。 
4.3.9 观察培养情况，若需取样分离培养，可将软管消毒，用无菌注射器插入软管抽取所需；量做进一步检查 。 
4.4 微生物限度检测操作过程 
4.4.1 取滤膜（直径50mm）N张，浸泡在纯化水里约5分钟。 
4.4.2 用镊子取出滤膜，平帖在不锈钢网面片放入不锈钢底座里，放入垫片和0型圈，将螺盖和杯体盖紧组装成一套完整的全封闭过滤培养器。 
4.4.3 灭菌，用牛皮纸将组装好的培养器包好，放入高压湿热灭菌锅里，121℃,0.1MPa进行灭菌。 
4.4.4 取灭菌好的培养器至微生物限度检定室，进行集菌过滤。 
4.4.5 打开配制好的固体培养基，将集菌好的滤膜平帖在培养基上（滤膜上不可以有气泡产生）。 
4.4.6 按照规定进行培养。 
4.5 注意事项 
4.5.1 在集菌仪泵头合上之前（需扣紧蠕动泵东快），严禁启动开关，否则将可能倒置手部受伤。 
4.5.2 若无菌室采用化学消毒剂消毒时，应将仪器移至封闭罩内，或搬出无菌室，以免损坏电子不见和仪器表面。 
4.5.3 应保持取样针上的过滤膜干燥，气流畅通，正常进液。方法是在取样针插入瓶装流体样品时，应先开机，然后倒置容器瓶。 
4.5.4 若敬业管内出现过多气泡，应将泵速降低，并检查进气滤膜是否被浸泡，若不能进液，则检查进液针是否畅通。